Influence of temperature on streptococcus agalactiae infection in Nile tilapia / Influência da temperatura na infecção de tilápias do Nilo por Streptococcus agalactiae

Environmental changes affect fish homeostasis, turning them more susceptible to diseases. In Brazil, outbreaks of Streptococcus agalactiae infection have been reported in Nile tilapia when they are outside of their thermal comfort zone. This investigation evaluated mortality rate and which were the most infected organs at temperatures that naturally occurred in southern of Brazil. Forty Nile tilapia (Oreochromis niloticus) were infected with S. agalactiae and distributed in four groups (n=10) and each group was exposed to a different temperature: G1: 24°C, G2: 26°C, G3: 28°C, and G4: 32°C. Fish were monitored for 10 days. In this period, fish that presented irreversible clinical signs were sacrificed and samples of brain, liver, and kidney were collected for bacteriological and molecular analysis. Signs compatible with a streptococcal infection were observed in all groups. Highest mortality rates occurred at 24°C and 32°C. The brain was the most affected organ with the highest percentage of isolation of S. agalactiae by both methods of diagnosis. The results suggest that, as in mammals, temperatures that are further away from the comfort zone influence fish homeostasis, increasing susceptibility to bacterial infections.

Mudanças ambientais afetam a homeostase dos peixes, tornando-os mais suscetíveis a doenças. No Brasil, têm sido relatados surtos de infecção por Streptococcus agalactiae em tilápia do Nilo, principalmente quando se encontram fora da zona de conforto térmico. No presente trabalho, foi avaliada a taxa de mortalidade e determinado quais foram os órgãos mais afetados por essa bactéria em temperaturas que ocorrem naturalmente no Sul do Brasil. Quarenta tilápias-do-nilo (Oreochromis niloticus) foram infectadas por Streptococcus agalactiae e distribuídas em quatro grupos (n = 10), cada um deles submetidos a diferentes temperaturas: G1: 24°C, G2: 26°C, G3: 28°C e G4: 32°C. Os peixes foram monitorados durante 10 dias. Os peixes com sinais clínicos irreversíveis foram sacrificados e coletadas amostras de cérebro, fígado e rins para análise bacteriológica e molecular. Foram observados sinais compatíveis com infecção estreptocócica em todos os grupos. A taxa de mortalidade mais elevada ocorreu nos grupos mantidos nas temperaturas de 24°C e 32°C. O cérebro foi o órgão mais afetado, com a maior percentagem de isolamento de S. agalactiae pelos dois métodos de diagnóstico. Os resultados sugerem que, tal como nos mamíferos, temperaturas que estão mais afastadas da zona de conforto afetam significativamente a homeostase dos peixes, aumentando a sua susceptibilidade para infecções bacterianas.

Isolamento de Streptococcus agalactiae em diferentes órgãos de tilápias do nilo (Oreochromis niloticus) criadas em tanques-rede / Isolation of Streptococcus agalactiae in different organs of nile tilapia (Oreochromis niloticus) reared in net cages

A estreptococose é uma das principais causas de mortalidade na criação de tilápias no Brasil, causando grandes perdas econômicas. Assim, o estudo objetivou determinar a frequência de isolamento e identificação por PCR de Streptococcus agalactiae em diferentes órgãos de tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus) naturalmente infectadas, oriundas de oito pisciculturas da região norte do estado do Paraná que apresentavam sinais clínicos característicos de infecção estreptocócica. Para tanto, coletaram-se amostras de sangue e fragmentos de rim, fígado, baço, coração e encéfalo. Essas foram semeadas em meio ágar infusão de cérebro e coração (BHI) adicionado 5% de sangue de ovino e incubados à 29ºC, durante 7 dias em aerofília. Após o crescimento bacteriano e a partir das características macro e microscópicas, foram selecionadas colônias compatíveis com as do gênero Streptococcus sp.. As espécies foram identificadas através de PCR e confirmadas por meio do sequenciamento do gene 16S rDNA. Os resultados demonstraram que em tilápias do Nilo infectadas com S. agalactiae, o isolamento é mais frequente em encéfalo, rim e fígado em ordem decrescente.

Streptococcosis is one of the major causes of mortality in tilapia's creation in Brazil, inducing great economic losses. As soon, the study objectived to determinate the frequency of isolation and identification the Streptococcus agalactiae in organs different of Oreochromis niloticus naturally infected, derived from eight fish farms in the northern region of the state of Paraná, that presented clinical signs characteristics of streptococcal disease. However, blood samples and fragments (kidney, liver, spleen, heart and brain) were collected. These all samples were plated on solid medium of brain and heart infusion (BHI) added 5% ovine blood and incubated at 29ºC for 7 days in aerophilic conditions. Behind, the bacterial growth and from the macro and microscopic features, colonies compatibles with Streptococcus sp. gender, were selected. The species were identified by PCR reaction and confirmed by sequencing of 16S rDNA gene. The results exhibited that in tilapia of Nile infected with S. agalactiae the isolation is more common in brain, kidney and liver in descending order.

Influence of glyceryl guaiacolate ether on anesthetics in tilapia compared to benzocaine and eugenol / Influencia del eter gliceril guayacolato sobre la anestesia en tilapias comparado con benzocaina y eugenol

Objective. The study aimed to investigate the effectiveness of glyceryl guaiacolate ether (GGE) and compare the times of induction, recovery, hematological changes, total protein and glycaemia among anesthetics in Nile tilapia, Oreochromis niloticus. Materials and methods. A total of 60 tilapia distributed in 3 aquariums (N=20) were used, which formed the group benzocaine (100 mg/L), eugenol (50 mg/L) and guaiacol glyceryl ether (9.000 mg/L). After the induction of anesthesia fish blood samples were collected to determine the complete hemogram and glycemia. Then the animals were placed in aquariums with running water for assessing the anesthesia recovery. Results. It was verified that GGE showed longer induction and recovery times as well a significant increase (p<0.05) of glycemia, when compared with the other groups (p<0.05). The concentration of total protein did not differ between groups (p>0.05). An increase in the number of monocytes in the group treated with benzocaine (p <0.05) was observed in the analysis of the hematological parameters with no difference between groups for other variables. Conclusions. Eugenol and benzocaine allow rapid induction and recovery in Nile tilapia, without evidence of stress during handling and GGE showed high induction and recovery times, being inadequate for anesthetic use in Nile tilapia.

Objetivo. El trabajo tuvo como objetivo investigar la eficacia del eter gliceril guayacolato (EGG) y comparar los tiempos de inducción, recuperación, alteraciones hematológicas, de proteínas totales y glicemia entre los anestésicos en tilapias del Nilo, Oreochromis niloticus. Materiales y métodos. Fueron utilizadas 60 tilapias distribuidas en 3 acuarios (n=20), que formaron los grupos benzocaína (100 mg/L), eugenol (50 mg/L) y éter gliceril guayacolato (9.000 mg/L). Después de la inducción anestésica se procedió a colectar la sangre para determinar el hemograma y glicemia. A seguir, los animales fueron colocados en acuarios con agua corriente para la evaluación de la recuperación anestésica. Resultados. Se verificó que el EGG presentó mayor tiempo de inducción y recuperación, así como aumento significativo (p<0.05) de la glicemia, cuando fue comparado con los otros grupos (p<0.05). La concentración de las proteínas totales no fueron diferentes entre los grupos (p>0.05). En el análisis de los parámetros hematológicos fue observado aumento del número de monocitos en el grupo tratado con benzocaína (p<0.05) sin diferencia ente los grupos para las otras variables. Conclusiones. El eugenol y la benzocaína permiten rápidas inducciones y recuperación en tilapias del Nilo, sin evidencias de estrés durante la manipulación y el EGG presenta tiempos elevados de inducción y recuperación, no siendo este adecuado para el uso en tilapias del Nilo.

Isolation and characterization of Streptococcus spp. group B in Nile tilapias (Oreochromis niloticus) reared in hapas nets and earth nurseries in the northern region of Parana State, Brazil

O objetivo deste trabalho foi isolar e caracterizar o Streptococcus spp. em tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus) cultivadas em sistema de tanque rede e em viveiros de terra. Oito propriedades de criação intensiva foram estudadas de 1 de abril de 2001 a 30 de abril de 2002. Em quatro propriedades, os peixes eram cultivados em sistema de tanque rede e em quatro em sistema de tanque terra. Ao todo foram analisadas 370 amostras de material colhido de 120 peixes (encéfalo, fígado, rim, raspado de pele, líquido ascítico e olho) que foram semeadas em ágar BHI (Brain Heart Infusion) contendo sangue ovino e extrato de levedura. Streptococcus spp. foi isolado de 36 amostras (18 amostras de encéfalo, oito de fígado, oito de rim e duas de líquido ascítico), provenientes de 25 peixes. Estreptococos foram isolados, quase na mesma proporção, nos dois sistemas de cultivo. Inicialmente os estreptococos foram caracterizados pela prova da catalase e esculina, crescimento em azul de metileno e NaCl a 6.5%. A classificação em grupos foi efetuada pelo Slidex Strepto-Kit (BioMerieux, França). As características fenotípicas foram determinadas pelo sistema de microtestes API 20 Strep (BioMerieux, França). As 36 amostras de estreptococos não apresentaram hemólise e foram classificadas no grupo B de Lancefield. Dessas, 16 amostras foram identificadas como Streptococcus agalactiae e 20 não foram caracterizadas pelo API 20 Strep, mas apresentaram o mesmo perfil bioquímico descrito para a cepa de referência de Streptococcus difficile (ND-2-22). A ausência de hemólise, classificação no grupo B e o perfil bioquímico sugerem que estes estreptococos podem pertencer à espécie Styreptococcus difficile.

Mastite bovina por Mycoplasma bovis em rebanhos leiteiros / Mastitis caused by Mycoplasma bovis in dairy cattle

Foram examinadas 713 vacas de três rebanhos leiteiros localizados na regiäo norte do Estado do Paraná e sudoeste do Estado de Säo Paulo, das quais 137 apresentaram mastite. Nas três propriedades foram detectados oito animais (1,12 por cento) com mastite clínica por Mycoplasma bovis. Destes animais, quatro tratados com oxitetraciclina e tilosina e três com enrofloxacina, näo responderam ao tratamento e foram descartados no decorrer da lactaçäo. Uma vaca medicada com enrofloxacina recuperou quase que totalmente a secreçäo láctea mas a eliminaçäo de M. bovis persistiu por toda lactaçäo. Esta vaca apresentou cura bacteriológica na lactaçäo seguinte. O descarte dos animais positivos, monitoramento bacteriológico e a aplicaçäo correta das medidas de prevençäo para as mastites contagiosas controlaram a disseminaçäo de M. bovis nos rebanhos

Etiologia das infecçöes intramamárias em vacas primíparas ao longo dos primeiros quatro meses de lactaçäo / Aetiology of mammary infections in primiparous cows during the first four months of lactation

De 88 vacas primíparas, oriundas de quatro rebanhos leiteiros, foram colhidas 1985 amostras de leite, ao longo dos 120 dias pós-parto, das quais 457 (23,02 por cento) apresentaram resultados microbiológicos positivos. Os estafilococos coagulase negativos (ECN) foram isolados em 316 (69,14 por cento) amostras. Corynebacterium bovis em 56 (12,25 por cento), estreptococos em 41 (8,97 por cento) e estafilococos coagulase positivos (ECP) em 38 (8,31 por cento). Mastite clínica foi detectada em nove (10,23 por cento) vacas. No primeiro dia pós-parto, 57 (64,77 por cento) animais e 114 (32,66 por cento) quartos apresentaram exames bacteriológicos positivos. Até o décimo quarto dia, ocorreu um decréscimo acentuado no número de vacas e quartos infectados, que posteriormente tendeu a estabilizar. Os ECN foram as bactérias mais isoladas ao longo de todo experimento, enquanto o número de estreptococos decresceu acentuadamente nas duas primeiras semanas pós-parto. As infecçöes por C. Bovis aumentaram progressivamente a partir do parto. Entre os ECN, predominaram o S. hyicus e o S. intermedius e, nos estreptocos, os do grupo C e D. A contagem média de células somáticas (CCS), nos quartos infectados, foi de 508,914/ml, enquanto que, nos quartos negativos, foi de 73,942/ml.